芒果果實多酚氧化酶（PPO）基因的克隆與表達分析

時間：2023-09-26作者：魏婷婷等 來源：《中國熱帶農(nóng)業(yè)》2023年第5期

摘 要：多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）是引起水果褐變的關(guān)鍵酶。為了研究芒果果實中PPO基因的功能，本試驗采用RACE方法從‘貴妃’芒果果實中克隆得到了1個PPO基因，該基因cDNA序列全長為1930bp，開放閱讀框為1782bp，編碼593個氨基酸。芒果PPO基因編碼的多酚氧化酶屬于親水性蛋白質(zhì)，分子重量為66.82KD，等電點為6.95，不含跨膜結(jié)構(gòu)和信號肽，為非分泌蛋白，包含Tyrosinase、PPO1_DWL和PPO1_KFDV保守結(jié)構(gòu)域。芒果PPO蛋白的二級結(jié)構(gòu)無規(guī)則卷曲、β-折疊和α-螺旋占比分別為63.58%、22.60%和13.83%，三級結(jié)構(gòu)與模板6els.1.A一致性達70.94%，可能與C2H2 and C2HC zinc fingers superfamily protein（TT1），Multidrug resistance protein, mate family（TT12）和Autoinhibited H(+)-ATPase isoform 10（AHA10）等存在相互作用。聚類分析表明該蛋白與開心果、橄欖、克萊門柚和甜橙等植物的親緣關(guān)系較近。通過qRT-PCR分析，芒果PPO基因主要在‘桂七’果皮中表達量較高，而在‘貴妃’果皮中表達量較低。該基因的克隆及其功能的研究對芒果抗酶促褐變品種的培育以及分子改良具有重大意義。

關(guān)鍵詞：芒果；多酚氧化酶；克隆；表達分析

全文刊登于《中國熱帶農(nóng)業(yè)》雜志